激光共聚焦顯微鏡是80年代發展起來的一項劃時代意義的高科技新產品，與傳統顯微鏡相比，激光激光激光共聚焦顯微鏡具有高分辨率，高靈敏度和高放大倍率。隨著軟件開發和應用技術的發展，激光共聚焦顯微鏡已成為形態學，分子細胞生物學，神經科學，藥理學和遺傳學領域的新一代強大的研究工具。

激光共聚焦顯微鏡利用激光束經照明針孔形成點光源對標本內焦平面上的每一點掃描,標本上的被照射點,在探測針孔處成像,由探測針孔后的光電倍增管( PM T)或冷電耦器件( cCCD)逐點或逐線接收,迅速在計算機監視器屏幕上形成熒光圖象。照明針孔與探測針孔相對于物鏡焦平面是共軛的,焦平面上的點同時聚焦于照明針孔和發射針孔,焦平面以外的點不會在探測針孔處成像,這樣得到的共聚焦圖象是標本的光學橫斷面,克服了普通顯微鏡圖象模糊的缺點。

而通過激光共聚焦顯微鏡進行樣品制備時，激光共聚焦顯微鏡樣品制備是檢測前的關鍵步驟。樣品需要用熒光探針（單，雙和三）標記。標本可以是固定的或活組織，或固定或活的貼壁培養。細胞應在共聚焦特殊培養皿或蓋玻片，懸浮細胞，萼片或滴劑和蓋玻片上培養，覆蓋。樣品最大厚度約1~2mm，蓋玻片厚度應小于0.17mm，滑塊厚度應在0.8~1.2mm之間，表面光滑，厚度均勻，并且沒有明顯的干擾熒光。固定樣品通常用密封片密封，通常使用通過使用pH 8.5-9的PBS制備的甘油密封。

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